蔗糖磷酸化酶（SP）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號	SH0121	售價（元）	2160
規(guī)格	50T/48S	CAS號

貨號	名稱	規(guī)格
SH0121	蔗糖磷酸化酶（SP）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)	50管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應的葡萄糖基低聚糖。此外，SP還能催化氫醌合成熊果苷，具有極強的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應用。

測定原理：

SP能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導致340nm光吸收值增加。測定340nm吸光度增加速率，即可計算SP活性。

組成：

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃避光保存，臨用前加6ml蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃避光保存，臨用前加12ml蒸餾水水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1 ml石英比色皿和蒸餾水。

粗酶液提取：

1. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心10min，取上清待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（10⁴個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

測定步驟：

1.分光光度計預熱30min，調節(jié)波長至340nm，蒸餾水調零。

2.操作表

試劑名稱	對照管	測定管
試劑一（μl）	600	600
試劑二（μl）	100	100
試劑三（μl）	200	200
樣本（μl）		100
蒸餾水（μl）	100
迅速混勻，于1ml石英比色皿，37℃下測定340nm的初始吸光值與反應2min后的吸光值，測定管記作A₁與A₂，對照管記作A₃與A₄，△A=（A₂- A₁）-（A₄- A₃）。